SEM monsters

vat met vloeibaar stikstof Monsters die met een SEM bekeken worden worden geleidend gemaakt voor electriciteit door ze met een sputter coater van een uiterst dun laagje (1,5-3,0 nm; nm = nanometer) goud of goud/palladium te voorzien. Objecten moeten ook bestand zijn tegen hoog vacuum en mogen dit vacuum niet verstoren, bijvoorbeeld door verlies van watermoleculen en gassen. Metalen, polymeren en kristallen leveren meestal weinig probleem op en behouden hun structuur in de SEM. Biologisch materiaal echter vergt een voorfixatie met bijvoorbeeld koude stikstof slush (cryo-fixatie) of chemische middelen. Cryo-gefixeerd materiaal kan men bij deze microscoop in een speciale ingebouwde eenheid vriesbreken, coaten en meteen bekijken (zie foto's en meer uitleg bij de Cryo-SEM pagina). Chemisch gefixeerd materiaal moet men eerst naspoelen en vervolgens over het kritisch punt drogen om beschadigingen door oppervlaktespanning te voorkomen. Als alternatief voor deze bewerkelijke stap wordt tegenwoordig soms chemisch drogen met hexamethyldisilazaan toegepast. Al dit materiaal moet eerst bedekt worden met een geleidend laagje goud voor men het in de FESEM kan gaan bekijken.
 
Voor het invriezen in de cryoeenheid, maar ook voor het koelen van de SEM wordt veel vloeibaar stikstof gebruikt (vat met vloeibaar stikstof hierboven). Geluid in wav of mp3 van het tappen van vloeibaar stikstof in een isolerende Dewar vat (lijkt op een grote thermofles) en mov filmpje.
 
Voorbereiding van het SEM materiaal
Stamper bedekt met een goudlaagje
Fruitfliegje bedekt met een goudlaagje
Stikstof slush
Stikstofvat
Vriesbrek-coat eenheid
1
2
3
4
5
Klik op plaatjes voor een zoom:
1 Stamper en fruitvliegje bedekt met laagje goud om geleiding van electronen in de SEM te bevorderen.
2 Stikstof slush vrieseenheid.
3 Klein vat met vloeibaar stikstof.
4 Vriesbreek-coating eenheid

http://www.vcbio.science.ru.nl/fesem/info/preparatie/print/

laatst aangepast: 1 okt 2011